Анализ изменения активности митохондрий в ооцитах коров в процессе их старения in vitro

Аннотация

Cтарение созревших ооцитов млекопитающих in vitro влияет на их дальнейшее практическое и научное использование. Тем не менее, существует мало данных об изменениях в ооцитах, происходящих в процессе их старения. В представленной работе изучен характер изменения активности митохондрий в зрелых ооцитах коров в процессе их пролонгированного культивирования in vitro. С этой целью ооцит-кумулюсные комплексы (ОКК) культивировали в течение 20 ч в среде ТСM-199 содержащей 10 % фетальной бычьей сыворотки, 10 мкг/мл фолликулостимулирующего (ФСГ) и 10 мкг/мл лютеинизирующего гормонов. После созревания ОКК и освобожденные от клеток кумулюса ооциты (ДО) переносили в аналогичную, но без гонадотропных гормонов среду и культивировали дополнительно в течение 12 часов. С целью оценки активности митохондрий ооциты, достигшие стадии метафазы II в конце созревания и пролонгированного культивирования окрашивали MitoTracker Orange. Наблюдался невысокий уровень активности митохондрий в ооцитах непосредственно после завершения ими созревания, в то время как к 12 ч пролонгированного культивирования активность митохондрий возрастала (P<0,05). В тоже время обнаружено, что удаление клеток кумулюса влияет на активность митохондрий в сторону ее понижения (Р<0,05). Полученные результаты свидетельствуют о повышении уровня митохондриальной активности в процессе старения ооцитов in vitro. Также они показывают, что удаление клеток кумулюса способно нивелировать данные возрастные изменения.