Preview

Генетика и разведение животных

Расширенный поиск
Доступ открыт Открытый доступ  Доступ закрыт Только для подписчиков

Функциональная активность митохондрий в нативных и девитрифицированных ооцитах BosTaurus при созревании In Vitro

Полный текст:

Аннотация

Трудности в разработке эффективной технологии витрификации женских гамет обусловлены особенностями строения ооцита, чувствительностью клеточных компартментов к воздействию сверхнизких температур, токсичностью криопротекторов. Цель настоящего исследования - оценить влияние предварительной обработки (перед витрификацией) ооцит-кумулюсных комплексов (ОКК) Bos Taurus жидкостью фолликулов (ЖФ) d ≤3 мм на митохондриальную активность (МА) в размороженных ооцитах. MA оценивали в: нативных ооцитах; нативных ооцитах, обработанных ЖФ; девитрифицированных ооцитах; девитрифицированных ооцитах, обработанных ЖФ (120 мин, 38,5°С). ОКК витрифицировали в соответствии с методом, описанным нами ранее (Кузьмина Т. И др., Ген.и разв. жив., 2014, № 4, С. 15-19). Девитрифицированные ооциты культивировали в среде ТС-199 с 20% фетальной бычьей сыворотки, 50 нг/мл бычьего пролактина (Sigma) совместно с 1х106кл/мл гранулезы в течение 24 ч при температуре 38,5°С в атмосфере 5% CO2 и 90%-ной влажности. Митохондрии визуализировали Mito Tracker Orange CMTMRos (MTOCMTMRos, Sigma). Показатели МА, выражавшиеся в уровнях интенсивности флуоресценции MTOCMTMRos (ИФMTOCMTMRos, мкA) фиксировали на стадиях диплотены, метафаз -I и II. Уровень МА до культивирования был значительно выше в нативных ооцитах, чем в девитрифицированных ооцитах (337 ± 17,4 мкА и 319±16,8 мкА против 87 ± 9,2 мкА и 171 ± 14,5 мкА, Р <0,01). Предварительная обработка ооцитов ЖФ повышала уровень МА в девитрифицированных ооцитах на стадиях метафазы I и II (131 ± 10,9мкА против 201 ± 8,7 мкА и 109 ± 9,9 мкА против 151 ± 12,8 мкА, Р <0,01). Не обнаружено различий в уровне МА в ооцитах на стадии метафазы I и II нативных и девитрифицированных ооцитов, предварительно обработанных ЖФ. Полученные результаты дополняют имеющиеся сведения о функционировании клеточных компартментов (митохондрий) в женских гаметах животных при воздействии сверхнизких температур.

Об авторах

Т. И. Кузьмина
«Всероссийский научно-исследовательский институт генетики и разведения сельскохозяйственных животных - филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный научный центр животноводства - ВИЖ имени академика Л. К. Эрнста»
Россия


Т. Хельмут
Лейбницкий Институт биологии сельскохозяйственных животных
Россия


Х. Альм
Лейбницкий Институт биологии сельскохозяйственных животных
Россия


Список литературы

1. Paul A. K. Vitrification of bovine matured oocytes and blastocysts in a paper container / A. K. Paul, Y. Liang, K. Srirattana, T. Nagai, R. Parnpai // Anim. Sci. J. - 2018. - V.89. - 2. - P. 307-315.

2. Katkov I. I. Influence of exposure to vitrification solutions on 2-cell mouse embryos: II. Osmotic effects or chemical toxicity? / I. I. Katkov, A. G. Pogorelov // CryoLetters. - 2007. - V.28. - P. 409-427.

3. Khalili M. A. Vitrification of human immature oocytes before and after in vitro maturation: a review / M. A. Khalili, A. Shahedi, S. Ashourzadeh, S. A. Nottola, G. Macchiarelli, M. G. Palmerini // J. Assist. Reprod. Genet. -2017. - V.34. - P.1413-1426.

4. Кузьмина Т. И. Модернизация этапов технологии экстракорпорального созревания донорских ооцитов Bos Taurus / Т. И. Кузьмина, А. В. Молчанов, Т. И. Станиславович, Д. Н. Татарская // Аграрный научный журнал. -2017. - № 3. - С. 9-14.

5. Кузьмина Т. И. Методы оценки функционального состояния донорских ооцитов, соматических клеток фолликулов и эмбрионов сельскохозяйственных животных / Т. И. Кузьмина, В. Ю. Денисенко, И. Ю. Лебедева, О. В. Шокин // Метод. рекомендации. Москва. - 2005. - 32 стр.

6. Kuzmina T. I. Effect of pre-treating bovine oocytes with the follicular fluid prior to vitrification on their nuclear-cytoplasmic maturation / T. I. Kuzmina, V. Yu. Denisenko, A. Yu. Malishev // Reproductive BioMedicine. 2010. V. 20. suppl. 3. P.538-539.

7. Кузьмина Т. И. Развитие доимплантационных эмбрионов Bos Taurus и Sus scrofa domesticus, полученных из девитрифицированных ооцитов / Т. И. Кузьмина, И. П. Шейко, А. И. Ганджа, К. П. Брюсов // Генетика и разведение животных. Санкт-Петербург-Пушкин. - 2014. - № 4. - С. 15-19.

8. Reader K. L. The Role of Oocyte Organelles in Determining Developmental Competence/ K. L. Reader, J.-A. L. Stanton, J. L. Juengel // Biology. - 2017. - V. 6. - P. 35.

9. Babayev E. Oocyte mitochondrial function and reproduction / E. Babayev, E. Seli // CurrOpinObstet Gynecol. - 2015. - V.27. - P. 175-181.

10. Roth Z. Reduction in oocyte developmental competence by stress is associated with alterations in mitochondrial function / Z. Roth // J. Dairy Sci. - 2018. - V. 101, 1-13.

11. Rybska M. Cytoplasmic and nuclear maturation of oocytes in mammals - living in the shadow of cells developmental capability / M. Rybska, S. Knap, M. Jankowski, M. Jeseta, D. Bukowska, P. Antosik, M. Nowicki, M. Zabel, B. Kempisty, J. M. Jaśkowski // Medical Journal of Cell Biology. - 2018. -V. 6. - P.13-17.


Для цитирования:


Кузьмина Т.И., Хельмут Т., Альм Х. Функциональная активность митохондрий в нативных и девитрифицированных ооцитах BosTaurus при созревании In Vitro. Генетика и разведение животных. 2018;(2):67-72.

For citation:


Kuzmina T..., Torner H..., Alt H... Functional activity of mitochondria in native and devitrified Bos Taurus oocytes during in vitro maturation. Genetics and breeding of animals. 2018;(2):67-72. (In Russ.)

Просмотров: 69


ISSN 2410-2733 (Print)