Оценка качества и устойчивости к возрастным изменениям ооцитов коров при созревании в однофазной и двухфазной системах культивирования
https://doi.org/10.31043/2410-2733-2021-1-3-8
Аннотация
Цель: изучение степени созревания и состояния хромосом в зрелых и стареющих ооцитах коров, созревающих в однофазной (1-фазной) и двухфазных (2-фазных) системах культивирования, а также оценка влияния эндогенного прогестерона на завершающем этапе созревания на данные показатели.
Материалы и методы. В данной работе проведено сравнительное исследование ядерного созревания и аномального изменения хромосом на стадии MII в ооцитах коров, созревающих в 1-фазной и различных 2-фазных системах IVM (in vitro maturation, созревание in vitro). Кроме того, впервые изучено влияние исследуемых условий на качество хромосом в процессе последующего старения зрелых яйцеклеток. При использовании 1-фазной системы IVM ооцит-кумулюсные комплексы (ОКК) культивировали в течение 24 ч в среде ТС-199, которая содержала 10% фетальную бычью сыворотку (ФБС), 10 мгк/мл фолликулостимулирующего (ФСГ) и 10 мкг/мл лютеинизирующего (ЛГ) гормонов. В 2-фазной системе ооциты созревали в тех же условиях в течение первых 16 ч, а затем в новой среде (ТС-199, содержащей 10% ФБС (контроль), или в этой же среде, дополненной 50 нг/мл прогестерона) в течение оставшихся 8 ч. После созревания в 1-фазной и 2-фазной системах часть ОКК переносили в среду старения (ТС-199, содержащую 10% ФБС) и дополнительно культивировали еще 24 часа. Состояние ядерного материала (стадия мейоза и аномальные изменения MII-хромосом) в зрелых и стареющих ооцитах оценивали с помощью цитогенетического анализа.
Результаты. Доля созревших ооцитов, находящихся на стадии MII мейоза через 24 ч созревания была сходной после 1-фазного и 2-фазного IVM и составила 82,7–86,3%. Кроме того, не выявлено влияния системы культивирования на долю MII-ооцитов с аномальными изменениями хромосом. Для 1-фазного культивирования данный показатель непосредственно после завершения периода IVM составил 32,2±0,5% и для 2-фазного 38,5±4,0%. При последующем старении ооцитов он возрастал до 56,9±2,9 и 68,4±3,0% соответственно. Эндогенный прогестерон в среде IVM (в течение последних 8 ч) также не влиял на степень завершения ядерного созревания, но снижал долю ооцитов с аномальными изменениями хромосом: после IVM как по сравнению с контролем, так и по сравнению с 1-фазным протоколом; после 24-часового пролонгированного культивирования по сравнению с контролем (P<0,05).
Заключение. Полученные данные позволяют сделать вывод, что двухфазная система созревания ооцитов коров может применяться как альтернатива общепринятому протоколу IVM, и что прогестерон во второй фазе IVM обусловливает повышение качества яйцеклеток и их устойчивость к возрастным трансформациям.
При поддержке: Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проект №17-29-08035).
Для цитирования:
Сингина Г.Н., Лебедева И.Ю., Шедова Е.Н., Цындрина Е.В. Оценка качества и устойчивости к возрастным изменениям ооцитов коров при созревании в однофазной и двухфазной системах культивирования. Генетика и разведение животных. 2021;(1):3-8. https://doi.org/10.31043/2410-2733-2021-1-3-8
For citation:
Singina G., Lebedeva I., Shedova E., Tsyndrina E. Assessment of bovine oocytes quality and their resistance to age-related changes after maturation in single-phase and two-phase culture systems. Genetics and breeding of animals. 2021;(1):3-8. (In Russ.) https://doi.org/10.31043/2410-2733-2021-1-3-8
Просмотров:
503
Послать статью по эл. почте 