Криоконсервация семени исходных форм и химер птиц двух пород: суссекс светлый и полтавская глинистая

Цель: оценка качества семени химер и исходных форм до и после криоконсервации.

Материалы и методы. Для исследований выбраны породы кур суссекс и полтавская глинистая. С использованием этих пород получены химеры методом трансплантации бластодермальных клеток. Оценку качества спермы петухов проводили под микроскопом при температуре 42°С. В разное время троекратно определяли активность нативной спермы и ее концентрацию. Криоконсервацию проводили в мелких гранулах. Размораживание гранул производили на нагретой металлической пластине при температуре 60°С.

Результаты. Сравнительный анализ объема эякулята показал, что у химер в среднем он был несколько больше, чем у исходных форм. Активность спермиев у нативных половых клеток была достаточно высока у всех исследованных образцов, и составляла 80% и более. Концентрация спермиев сохраняла ту же тенденцию и практически не отличалась друг от друга у всех исследованных образцов. Активность заморожено-оттаянного семени исходных пород и их химер значительно отличалась. Максимальная ее активность наблюдалась у породы суссекс и достоверно ниже (Р≤ 0,01) она у остальных экспериментальных групп. Активность заморожено-оттаянного семени оказалась равной у химерных организмов и полтавской глинистой, хотя у химер реципиенты были суссексы. Следует отметить, что размах колебаний по степени активности заморожено-оттаянного семени у химерных птиц был    значительным (от 10 до 40 баллов), а число наблюдений небольшое.

Заключение. В исследовании проведена оценка качества семени химер и исходных форм до и после криоконсервации. Продемонстрировано, что после размораживания активность заморожено-оттаянного семени исходных пород и их химер отличалась.

1. Фисинин В. И. Криоконсервация мужских половых клеток как метод сохранения генетических ресурсов сельскохозяйственной птицы / В. И. Фисинин, В. А. Багиров, Н. А. Волкова, Н. А. Зиновьева, Я. С. Ройтер // Достижения науки и техники АПК. – 2012. – №8.

2. Tae H. J. Cryopreservation and its clinical applications / H. J. Tae, C. P. Sung, H. Y. Ji, Y. K. Jung, H. S. Jae, S. P. Ui, W. C. Chang, R. L. Sung, H. Jin // Integr. Med. Res. – 2017. – V. 6 (1). – P. 12-18.

3. Woelders H. Animal genetic resources conservation in the NNetherlands and Europe: poultry perspective / H. Woelders, C. A. Zuidberg, S. J. Hiemstra // Poultry Sci. – 2006. – V. 85. – P. 216-222.

4. Purdy P. H. Evaluation of glycerol removal techniques, cryoprotectants, and insemination methods for cryopreserving rooster sperm with implications of regeneration of breed or line or both / P. H. Purdy, Y. Song, F. G. Silversides and H. D. Blackburn // Poultry Sci. – 2009. – V. 88. – P. 2184-2191.

5. Santiago-Moreno J. Semen cryopreservation for the creation of a Spanish poultry breeds cryobank: optimization of freezing rate and equilibration time / J. Santiago-Moreno, C. Castano, A. Toledano-Diaz, Lopez-Sebastian, M. T. Prieto, J. L. Campo // Poultry Sci. – 2011. – V. 90. – № 9. – P. 2047-2053.

6. Нарубина Л. Е. Способ криоконсервации спермы петухов в виде гранул / Л. Е. Нарубина, А. Д. Курбатов, Г. Б. Бубляева, К. В. Целютин // Авторское свидетельство СССР №1343587, 1987.

7. Козикова Л. В. Химеры птиц: методы получения и перспективы их использования / Л.В. Козикова // Птицеводство. – 2019. – Т.10. – №9. – С.9-13.

8. Целютин К. В. Криоконсервация спермы птиц — как инструмент сохранения генофонда / К. В. Целютин, Б. К. Тур // Генетика и разведение животных. – 2009. – №1. – С. 50-52.

9. Наук В. А. Усовершенствованный метод длительного сохранения семени быков производителей в глубокозамороженном состоянии / В. А. Наук // Совершенствование методов воспроизводства сельскохозяйственных животных. – Кишинев, 1979. – С.3-37

10. Fujihara N. Simple and rapid cryopreservation of rooster spermatozoa / N. Fujihara, S. Ohboshi // Low Temperature Medicine. – 1991. – V.17. – P. 12.

11. Van Voorst A. Fertility rate of daily collected and cryopreserved fowl semen / A. Van Voorst, F. R. Leenstra // Poultry Sci. – 1995. – V.74. – P. 136-140.

12. Wishart G. J. Quantitation of the fertilizing ability of fresh compared with frozen and thawed fowl spermatozoa / G. J. Wishart // Br. Poultry Sci. – 1985. – V.26. – P. 375-380.