Фенотип клеток адаптивного иммунитета костного мозга у лактирующих мышей и новорождённых мышат

Цель: выявить субпопуляции Т-лимфоцитов в костном мозге у лактирующих мышей и новорождённых мышат. 

Материалы и методы. Исследования проводились на лактирующих мышах и новорождённых мышатах. Были сформированы 2 группы по 5 животных в каждой. Для опыта у животных отбирали костный мозг из проксимального отдела бедренной кости. Отрезали головку бедра и извлекали костный мозг при помощи шприца, которым промывали костномозговую полость солевым раствором. Фенотип клеток адаптивного иммунитета определяли с помощью набора флуорохром-конъюгированных антител: CD4-PerCP-Cy5.5, CD8-PE/Cy7, CD62L-APC/ Cy7, CD44-BV510. Сбор данных осуществляли на проточном цитометре CytoFlex (Beckman Coulter, США). Результаты анализировали в программе Kaluza Analysis 2.1. 

Результаты. В результате исследования установлено, что CD8⁺ T-клеток эффекторной (T_EM; CD44⁺CD62L^-) и центральной памяти (T_CM; CD44⁺CD62L⁺) больше у взрослых особей, тогда как доля CD4⁺Т-клеток памяти наивной памяти (T_NV; CD44^-CD62L⁺) преобладает у мышат. Содержание субпопуляции CD8⁺ Т-клеток наивной памяти (T_NV; CD44^-CD62L⁺) в 1,31 раза больше у новорождённых мышат и составило 81,97±2,38 % и 62,57±1,48 %, соответственно. Установлено достоверно низкое содержание популяций СД4⁺Т - клеток эффекторной памяти (T_EM; CD44⁺CD62L^-) у мышат 5,62±2,15 % по сравнению со взрослыми особями 13,26±1,93 % (р<0,05). CD8⁺ Т-клетки эффекторной и центральной памяти (Т_EM; T_CM;) в большом количестве проникают в костный мозг. Это свидетельствует о том, что лимфоциты принимают активное участие в клеточных механизмах иммунного ответа. В костном мозге в процессе иммунных реакций формируются и накапливаются многочисленные субпопуляции Т-лимфоцитов, в частности, цитотоксические клетки и Т-клетки памяти, непосредственно отвечающие за адаптивный иммунитет.

1. Шиффман Ф. Д. Патофизиология крови: Пер. с англ / Ф. Д. Шиффман. – М. – СПб.: «Издательство БИНОМ» - «Невский диалект», 2000. – 448 с.

2. Воронин Е. С. Иммунология / Е. С. Воронин, А. М. Петров, М. М. Серых, Д. А. Дервишов. – Москва : Колос-Пресс, 2002. – 408 с. – ISBN 5-901705-11-4. – EDN QXESQF.

3. Bianco P. Bone and the hematopoietic niche: a tale of two stem cells / P. Bianco // Blood. – 2011. — № 117. – P. 5281–5289. doi: 10.1182/blood-2011-01-315069.

4. Gurkan U. A. The mechanical environment of bone marrow: a review / U. A. Gurkan, O. Akkus // Ann Biomed Eng. – 2008. — № 36. — 1978–1991. doi: 10.1007/s10439-008-9577-x.

5. Feuerer M. Bone marrow as a priming site for T-cell responses to blood borne antigen / M. Feuerer, P. Beckhove et al. // Nat Med. – 2003. — № 9. — 1151–1157. doi: 10.1038/nm914.

6. Duffy D. Neutrophils transport antigen from the dermis to the bone marrow, initiating a source of memory CD8+ T cells / D. Duffy, H. Perrin et al. // Immunity. – 2012. — № 37. – P. 917–929.

7. Di Rosa F. Memory T-cell competition for bone marrow seeding / F. Di Rosa, A. Santoni // Immunology. – 2003. — № 108. – P. 296–304. doi: 10.1046/j.1365-2567.2003.01593.x

8. Mazo I. B. Bone marrow is a major reservoir and site of recruitment for central memory CD8+ T cells / I. B. Mazo, M. Honczarenko et al. // Immunity. – 2005. — № 22. — P. 259–270.

9. Tokoyoda K. Professional memory CD4+ T lymphocytes preferentially reside and rest in the bone marrow / K. Tokoyoda, S. Zehentmeier et al. // Immunity. – 2009. — № 30. – P. 721–730.

10. Pulle G. IL-15-dependent induction of 4-1BB promotes antigen-independent CD8 memory T cell survival / G. Pulle, M. Vidric, T. H. Watts // J Immunol. – 2006. — №176. – P. 2739–2748.

11. Herndler-Brandstetter D. Human bone marrow hosts polyfunctional memory CD4+ and CD8+ T cells with close contact to IL-15-producing cells / D. Herndler-Brandstetter, K. Landgraf et al. // J Immunol. – 2011. — № 186. – P. 6965–6971.

12. Di Rosa F. The bone marrow: a nest for migratory memory T cells / F. Di Rosa, R. Pabst // Trends Immunol. – 2005. — № 26. – P. 360–366. doi: 10.1016/j.it.2005.04.011.

13. Скопичев В. Г. Молоко: учеб. пособие / В. Г. Скопичев, Н. Н. Максимюк – Санкт-Петербург: Проспект Науки, 2011. – 368 с.

14. Скопичев В. Г. Иммунобиология молочной железы и молочная продуктивность / В. Г. Скопичев, В. Б. Прозоровский. – Beau Bassin: Lap LAMBERT Academic Publishing, 2018. – 328 с.

15. Panova N. A. A role for cellular immunity in early postpartum period / N. A. Panova, V. G. Skopichev // Medical Immunology (Russia). – 2021. – Vol. 23. — № 4. – P. 853—858.

16. Патент № 2743345 C1 Российская Федерация, МПК G01N 33/49. Способ оценки клеточного иммунитета при молозивном вскармливании животных: № 2019143557 : заявл. 20.12.2019 : опубл. 17.02.2021 / Н. А. Панова, В. Г. Скопичев; заявитель ФГБОУ ВО Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины ФГБОУ ВО СПбГАВМ. – EDN NCTBPY.